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大多數重組抗體都有異構體，這些異構體主要是來自于細胞培養生產過程中的翻譯后修飾、酶解或是降解，并且在生產、純化、和存儲過程中逐步累積，有必要進行異構體分析。異構體分析書寫基本策略1.判類別：據有機物的分子組成判定其可能的類別異構(一般用通式判斷)。2.寫碳鏈：據有機物的類別異構寫出各類異構的可能的碳鏈異構。一般采用“減鏈法”，可概括為：寫直鏈，一線串；取代基，掛中間；一邊排，不到端；多碳時，整到散。即①寫出長碳鏈，②依次寫出少一個碳原子的碳鏈，余下的碳原子作為取代基，找出中心...
寬PH色譜柱具有很好溶劑耐受性，所有適用于HPLC的溶劑均可作為流動相或者樣品溶媒使用。因此它可以用于各種分析條件，不必擔心因溶劑使用不當而造成的劣化或者損壞。同時也進一步擴大了分離條件的選擇范圍，能夠分離更多的手性化合物。1.提高柱效的方法要提高液相色譜的效率可從以下幾方面入手。(1)降低移動相的流速,但會使分析時間延長。(2)減少固定相的量,但寬PH色譜柱中樣品的負載量也隨之減小。(3)減小固定相的顆粒度,但不能過分,過分后色譜柱的滲透率也會減小。(4)選用低粘度的移動相...
凝膠色譜柱的應用也越來越廣泛，使用過后也要對色譜柱進行保養，這樣才能使它的使用壽命更長久。凝膠色譜柱應該如何進行清洗和存放呢？1.色譜柱的清洗。為了不使被測物質和雜質停留在色譜柱中，在每次的樣品分析工作完成之后，都應及時地清洗色譜柱。首先要用對被測樣品洗脫能力強的溶劑來洗脫色譜柱，以分析工作中常用的反相色譜分析法為例，因其先流出的物質是極性大的物質，此時應用純甲醇或使用異丙純等極性稍弱的溶劑將吸附在柱內的極性小的物質洗脫下來，洗脫液的用量一般為柱體積的20倍即可。如果流動相是...
色譜柱的使用注意內容：a.使用預柱保護分析柱(硅膠在極性流動相/離子性流動相中有一定的溶解度)b.大多數反相色譜柱的pH穩定范圍是2-7.5，盡量不超過該色譜柱的pH范圍c.避免流動相組成及極性的劇烈變化d.流動相使用前必須經脫氣和過濾處理e.如果使用極性或離子性的緩沖溶液作流動相，應在實驗完畢柱子沖洗干凈，并保存于甲醇或乙腈中f.氯化物的溶劑對其有一定的腐蝕性，故使用時要注意，柱及連接管內不能長時間存留此類溶劑，以避免腐蝕
反相色譜柱的選擇：1.柱子的PH值使用范圍反相色譜柱優點是固定相穩定，應用廣泛，可使用多種溶劑。但硅膠為基質的填料，使用時一定要注意流動相的PH范圍。一般的C18柱PH值范圍都在2-8，流動相的PH值小于2時，會導致鍵合相的水解;當PH值大于7時硅膠易溶解;經常使用緩沖液固定相要降解。一旦發生上述情況，色譜柱人口處會塌陷。同樣填料各種不同牌號的色譜柱不盡相同。2.填料的端基封尾(或稱封口)把填料的殘余硅羥基采用封口技術進行端基封尾，可改善對極性化合物的吸附或拖尾;含碳量增高了...
如何正確的使用可以延長液相色譜柱的壽命？1、“保護柱”的使用保護柱是很短的色譜柱，填裝和液相色譜柱相同的填料。正確使用”保護柱”，可以起到阻攔一些容易損壞液相色譜柱的物質的作用。從而達到延長柱子壽命的效果。相反，如果使用”保護柱”不當，可能會縮短色譜柱的使用壽命。例如，在保護柱使用過程中，如果污染達到一定程度而沒有及時更換，累積的雜物很可能會沖入色譜柱中，反而會造成色譜柱損壞。因此，在使用”保護柱”時，重要的是要知道什幺時候該換保護柱。該換的時候就必須要立即更換。2、選擇高品...
C18液相色譜柱使用注意事項1.看清說明書后再使用色譜柱內部保存著什么溶劑一定要看清楚，因此色譜柱的說明書一定要看清楚，當然也包括說明書上建議的維護保養規定，對我們都非常的有用。對于反相柱來說，溶劑基本就是乙腈或甲醇。但正相柱就不同了，因為正相柱除了可以適用正相系統，也可以適用反相系統，因此一定要看清楚，對于你的方法來說是否需要置換色譜柱內部保存溶劑。2.用純水沖洗色譜柱才能把緩沖液沖洗干凈使用強溶劑沖洗色譜柱對內部填料的損傷是大的，尤其是純水，除非你的色譜柱是耐水的。沖洗色...
反相c18色譜柱是在硅膠上或雜化基質顆粒上鍵合了C18鍵合相的色譜填料所裝填的色譜柱，按反相色譜條件進行操作和分離。反相是液相色譜中常使用的分離模式，而C18柱是常使用的反相色譜柱之一。反相色譜柱的選擇性主要為疏水作用、立體選擇性和氫鍵作用，還有一些二級作用，比如：離子交換、金屬螯合作用等。我們來分析下反相c18色譜柱的表征參數：1.疏水作用（Hy）：通過相同流動相體系，在不同的反相色譜柱對進行乙基苯測試，考察乙基苯的保留因子，保留因子越大，柱的疏水作用越強。2.立體選擇性（...
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