使用陽(yáng)離子交換色譜柱進(jìn)行分析需遵循標(biāo)準(zhǔn)化操作流程,結(jié)合樣品特性與分離目標(biāo)優(yōu)化參數(shù)。
陽(yáng)離子交換色譜柱實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
色譜柱選擇
固定相類(lèi)型:根據(jù)目標(biāo)離子性質(zhì)選擇強(qiáng)/弱陽(yáng)離子交換柱。例如:
強(qiáng)陽(yáng)離子交換柱(磺酸基-SO??):適用于堿金屬、堿土金屬及高價(jià)金屬離子(如Ca²?、Fe³?)。
弱陽(yáng)離子交換柱(羧酸基-COO?):適用于有機(jī)胺類(lèi)或低親和力離子。
柱規(guī)格:根據(jù)樣品量選擇內(nèi)徑(如2.1mm微柱適合微量分析,4.6mm標(biāo)準(zhǔn)柱適合常規(guī)分析)和柱長(zhǎng)(短柱150mm平衡分離效率與速度)。
流動(dòng)相配制
緩沖液選擇:常用檸檬酸、磷酸鹽或醋酸鹽緩沖液,需滿(mǎn)足以下條件:
pH范圍:陽(yáng)離子交換需低pH(如pH 2-4),確保目標(biāo)離子帶正電且固定相功能基團(tuán)解離。
離子強(qiáng)度:通過(guò)添加NaCl或KCl調(diào)節(jié),低鹽濃度(如0.01M)促進(jìn)離子吸附,高鹽濃度(如1M)用于洗脫。
純度要求:使用超純水(電阻率≥18.2MΩ·cm)和試劑級(jí)鹽類(lèi),避免金屬離子污染。
儀器準(zhǔn)備
色譜系統(tǒng):檢查泵、進(jìn)樣器、檢測(cè)器(如電導(dǎo)檢測(cè)器或質(zhì)譜)的密封性和流路清潔度。
系統(tǒng)沖洗:用流動(dòng)相以1mL/min流速?zèng)_洗系統(tǒng)30分鐘,排除氣泡和殘留溶劑。